Ученые разработали метод анализа мочи, который позволяет определять дисбаланс аминокислот. В его основе лежит использование фталилглицилхлорида – хлор- и азотсодержащего органического соединения с двумя углеродными кольцами, которое способно связываться со многими аминами и аминокислотами.

Ученые Кубанского государственного университета (КубГУ) совместно с коллегами разработали метод одновременного обнаружения основных аминокислот, содержащихся в моче, с помощью реагента фталилглицилхлорида. Это соединение в 5–7 раз дешевле, чем наиболее часто используемые при аналогичных анализах вещества, например, дансилхлорид, сообщила пресс-служба Российского научного фонда (РНФ), поддержавшего грантом исследование, результаты которого опубликованы в Journal of Chromatography Open.

Существующие методы отслеживания аминов и аминокислот дороги, трудоемки и требуют большого количества реагентов, а также не позволяют одновременно проводить анализ для выявления сразу нескольких соединений. Авторы взяли пробы мочи 20 волонтеров (мужчин и женщин в возрасте 30–45 лет), добавили в образцы ацетонитрил (растворитель со слабым запахом) и муравьиную кислоту, чтобы удалить из мочи лишний белок, который мог исказить результаты исследования. Затем химики добавили в полученную жидкость фталилглицилхлорид. Он взаимодействовал сразу с 18 аминокислотами и аминами, в отличие от других применяющихся сейчас реагентов, которые связывают только какое-то одно вещество.

В результате реакции фталилглицилхлорида с искомыми веществами образовались высокостабильные соединения. Если сами аминокислоты в моче желательно исследовать в первые 8–10 часов с момента подготовки пробы, поскольку эти молекулы быстро разрушаются, то соединения аминокислот с фталилглицилхлоридом можно хранить в течение 48 часов, и анализ не теряет точности. Это повышает эффективность использования приборов в медицинских лабораториях и дает больше времени на проведение исследований.

Затем ученые определили в полученных пробах состав и количество аминокислот и аминов, связанных с фталилглицилхлоридом. Для этого образцы по очереди помещали в масс-анализатор. Поскольку у каждой молекулы разная масса, а в электрическом поле у нее еще появляется индивидуальный заряд, по характеру движения можно определить, какой химический состав она имеет.

Точность метода проверили, проведя аналогичный эксперимент с синтетической мочой, в которой содержание аминов и аминокислот было заранее известно. По отдельным аминокислотам (например, аргинину, гистидину, цистину и глицину) чувствительность нового метода оказалась выше, чем у широко применяющегося в лабораториях метода с использованием дансилхлорида, в 50 раз. Авторы подчеркивают, что предложенный подход готов для внедрения в биомедицинских центрах.

Как сообщил руководитель проекта профессор кафедры аналитической химии КубГУ Азамат Темердашев, метод планируется расширить и определять амины и аминокислоты в крови, что важно для выявления генетических заболеваний у новорожденных. Кроме того, продолжатся эксперименты с другими реагентами, чтобы с их помощью облегчить анализ на стероидные гормоны.

Источник: medvestnik.ru